1g固体酶（或1mL液体酶），在（40±0.1）℃、指定pH条件下（酸性纤维素酶pH6.0，中性纤维素酶pH7.5），水解羧甲基纤维素钠底物，使底物黏度降低而得到的相对于标准品的纤维素酶相对酶活力。黏度的降低与内切纤维素酶活力成正比。为与采用相同底物的CMCA-DNS法区分，该法可简写为CMCA-VIS（VIS表示viscosity）。
1.实验试剂及仪器
① 磷酸缓冲液，0.1mol/L pH6.0（适用于酸性纤维素酶）：同滤纸酶活力。
② 磷酸缓冲液，0.1mol/L pH7.5（适用于中性纤维素酶）：分别称取22.49g一水磷酸二氢钠、148.98g二水磷酸氢二钠和PEG6000（聚乙二醇）10.0g，将其溶解在10L去离子水中。调解溶液的pH到（7.5±0.05）备用。溶液在室温下可保存一个月。
③ 羧甲基纤维素钠：BLANOSE 7LF（Hercules Incorporated），在25℃，取代度65%～90%，2%水溶液的黏度为20～50mPa·s。
④ CMC-Na溶液：称取35g CMC-Na，精确至1mg，缓慢加入约700mL相应的缓冲液，加热至80～90℃，边加热边磁力搅拌，直至CMC-Na全部溶解，冷却后用相应的缓冲液稀释至950mL，用2mol/L盐酸或者氢氧化钠调节溶液的pH到（6.0±0.05）（酸性纤维素酶）或（7.5±0.05）（中性纤维素酶），最后定容到1000mL，搅拌均匀，贮存于冰箱中备用。在冰箱中的贮存使用期最长为3d。使用前应校正pH至相应的范围。
⑤ 标准酶：酸性或中性。
⑥ a.振荡黏度计，MIVI 8004（Safraser，France）或同等分析效果的仪器；b.恒温水浴（50±0.1）℃；c.漩涡混合器；d.10mL塑料试管（100mm×13mm）；e.高精度自动分配器；f.秒表。
2.实验步骤
（1）黏度计的校准
使用标准黏度样品校准黏度计。100mPa·s，数值显示在（1800±50）mV；10mPa·s，数值显示在（750±10）mV。
（2）绘制标准曲线
称取一定量的酸性或中性标准酶，用相应的缓冲溶液溶解，作为标准贮备液。然后将贮备液梯度按表9-2或表9-3稀释到最终浓度作为酶标准使用溶液备用。酶标准贮备液和使用溶液每日应重新配置。标准酶使用溶液的浓度可以根据标准酶进行调整。
表9-2 酸性纤维素酶标准曲线
表9-3 中性纤维素酶标准曲线
（3）标准对照酶样的制备
称取一定量的标准对照酶样，精确至1mg，用与溶解相应标准酶同样的缓冲液溶解。标准对照酶样溶液的浓度，应根据配置的酶标准使用溶液的浓度范围进行调整，使稀释后对照样的酶活恰好落在标准曲线的中部。
（4）待测酶液的准备(www.xing528.com)
称取少量酶样，用相应的缓冲液溶解，磁力搅拌15min，并稀释到一定体积，使稀释后样液的酶活恰好落在标准曲线的中部。
（5）样品的测定
取若干支专用试管。按表9-4规定，分别吸取各种溶液于各管中（每种样液平行作3个）。每个试管操作间隔应以秒表准确控制，保持间隔时间相同，按放入顺序依次取出试管，迅速插入振荡黏度计（插入时黏度计切忌碰试管壁），读数。
表9-4 试验步骤
注：①每做完一个样，振荡棒要擦拭干净。②严格控制时间间隔。
3.结果计算
（1）标准曲线的绘制
以酶标准使用溶液的酶活力为横坐标，以读取的黏度计读数为纵坐标，绘制标准曲线，获得线性回归方程，线性回归系数大于0.9975以上时方可使用（否则须重做）。
（2）CMCA-VIS酶活力计算
CMCA-VIS酶活力按式（9-5）计算：
式中 X1——羧甲基纤维素（黏度法）酶活力，U/g（或U/mL）
X0——通过标准曲线查得或计算出的酶活力，U/g（或U/mL）
V——容量瓶的体积，mL
n——进一步稀释的倍数
m——称取（或吸收）样品的量，mL（或g）
同一试样两次测试结果的绝对差值，不得超过算术平均值的10%。
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