色谱法：气、液、薄层、超临界流体的应用与检测限

色谱法也叫色层法或层析法，它是利用物质各组分在两相间分配系数的不同，实现各组分分离的目的，并将待测浓度转化为电信号记录下来的方法。目前色谱法主要有气相色谱法、高效液相色谱法、薄层色谱法、超临界流体色谱法。

1.气相色谱（GC）法

随着现代仪器分析方法的发展，气相色谱法已成为目前典型的，应用最广泛的仪器分析方法之一。在农药测定方面的应用主要是从20世纪60年代开始的，可以这样认为，由于气相色谱的应用，特别是高灵敏度的选择性检测仪器的应用，农药残留量的测定水平提高到了一个新的台阶。就在各种新的检测方法不断出现的今天，气相色谱法仍占绝对的优势，就是由过去的以填充柱为主转变为目前的以毛细管柱为主。由于石英毛细管柱的出现和进样系统的不断改进，大大提高了气相色谱法的分析精度、准确度和灵敏度，但气相色谱法对于挥发性差、极性和热不稳定性的农药分析较困难。AOAC对大部分有机磷农药，如乙拌磷、丰索磷、马拉硫磷、对硫磷，在80年代就建立了气相色谱检测方法。我国食品理化检验国家标准方法也采用了气相色谱检测有机磷农药，检测限为1ng。该方法是利用经提取、纯化、浓缩后的有机磷农药注入气相色谱柱，程序化升温汽化后，不同的有机磷农药在固相中分离，经不同的检测器检测扫描绘出气相色谱图，通过保留时间来定性，通过峰或峰面积与标准曲线对照来定量。一次可同时测定多组分，简便快捷，灵敏度高，准确性也好，目前，是检测有机磷的国家标准方法。

2.高效液相色谱（HPLC）法

高效液相色谱法形成于20世纪70年代，是在液相色谱柱层析的基础上，引入气相色谱理论并加以改进而发展起来的色谱分析方法，其是一种以流体为流动相的高效、快速的分离技术，常用于测定高沸点和热不稳定的大分子量农药残留，具有分离速度快、效率高、灵敏度高等优点，但是高效液相色谱法要配备昂贵的检测仪器，试剂消耗也比较大，主要用于检测一些不适于气相色谱上检测的少数农药。AOAC中有近半数的有机磷农药都建立了高效液相色谱法，研究报道也很多。(www.xing528.com)

3.薄层色谱（TLC）法

薄层色谱法原理是被检测物经显色后同标准有机磷农药对比来定性，然后用薄层扫描仪来定量的检测方法。它可以同时分析多个样品，主要用于复杂混合物的分离及筛选。特点是成本低、可现场操作，与荧光显色技术结合，对有机磷的检测限为0.01μg，与酶抑制技术结合，检测限可达0.001pg。但本身准确度不高且预处理繁琐，适用范围较窄。

4.超临界流体色谱（SFC）法

超临界流体色谱法是产生于20世纪80年代的技术，以超临界流体为流动相，综合了气相色谱与其他一些色谱的优点，超临界流体具有气、液双重性质，有黏度小、传质阻力小、扩散速度快等特点。此外，它还能与气相和液相的检测器相匹配，与其他检测手段联用，是一种强有力的分离和检测手段。