【摘要】：本书中所采用的碳酸酐酶活性检测方法是基于1948年Wilbur和Anderson发明的量电法[160]所改进。其原理为通过往样品中加入0 °C饱和CO2溶液，测定反应体系pH下降一定程度所需时间，以此来表征碳酸酐酶酶活性，具体步骤如下：称取1.84 g巴比妥、10.30 g巴比妥钠，加水稀释至1 L并滴加盐酸将pH调至8.3，即为pH＝8.3的巴比妥缓冲液。
本书中所采用的碳酸酐酶活性检测方法是基于1948年Wilbur和Anderson发明的量电法[160]所改进。其原理为通过往样品中加入0 °C饱和CO2溶液，测定反应体系pH下降一定程度所需时间，以此来表征碳酸酐酶酶活性，具体步骤如下：
称取1.84 g巴比妥、10.30 g巴比妥钠，加水稀释至1 L并滴加盐酸将pH调至8.3，即为pH＝8.3的巴比妥缓冲液。在4 °C环境下，向二蒸水中通入二氧化碳半小时以上，制得含饱和二氧化碳的蒸馏水。取100 mL原位水样，用离心机在6 000 g下对其离心10 min，去上清液并收集藻细胞，利用4 °C预冷的巴比妥缓冲液对其进行洗涤一次后，重新用8 mL巴比妥缓冲液悬浮藻细胞。将巴比妥藻液置于密闭离心管中并借助超声波细胞粉碎仪破碎1 min后取出。在4 °C环境下将4 mL饱和二氧化碳蒸馏水迅速加入细胞均浆液中，并利用pH计记录pH从8.3降至7.8所需的时间。另一方面，用蒸馏水代替原位水样进行平行试验，并同样记录pH从8.3降至7.8所需时间。碳酸酐酶酶活性通过样品和对照样pH下降用时计算，用EU表示，计算公式如下：(www.xing528.com)
其中，T为样品pH下降所需时间，T0为对照样所需时间。
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