淫羊藿苷提取工艺优化及其纯化

11.6.4　淫羊藿苷

淫羊藿苷（icariin），又名淫羊藿素，是淫羊藿（Epimedium brevicornum）的主要成分。淫羊藿为小檗科（Berberidaceae）多年生草本植物淫羊藿、箭叶淫羊藿（E.sagittatum）、柔毛淫羊藿（E. pubescens）、巫山淫羊藿（E.w ushanense）或朝鲜淫羊藿（E. koreanum）的干燥地上部分。近年来研究表明，淫羊藿的药理作用主要集中在免疫、生殖系统、核酸代谢、心脑血管系统及抗衰老等方面，同时在抗肿瘤方面的药效研究也取得一定的进展。淫羊藿的主要化学成分为黄酮类化合物，其中以淫羊藿苷为代表成分。淫羊藿总黄酮具有增加脑血流和冠脉流量、抗肿瘤、抗氧化和增强机体免疫力等功效，还具有雄性激素样作用、降压、抗骨质疏松和抗衰老等作用。淫羊藿苷能增加心脑血管血流量、促进造血功能、免疫功能及骨代谢，具有抗菌消炎、镇咳平喘、补肾壮阳、抗衰老、抗肿瘤等功效。

1.淫羊藿苷的化学结构

2.理化性质

（1）性状：淫羊藿苷为淡黄色针状结晶（含水吡啶），熔点231～232℃，分子式C₃₃ H₄₀ O₁₅，相对分子质量676.75，［α］²²_D＝—92°。

（2）溶解性：淫羊藿苷易溶于乙醇、乙酸乙酯，难溶于水，不溶于醚、苯、三氯甲烷。

3.淫羊藿总黄酮的生产工艺

淫羊藿总黄酮一般用水或含水乙醇提取，可采用煎煮、回流、超声或微波提取法。分离方法中以碱溶酸沉法较为理想，其次为乙酸乙酯萃取法。纯化方法有大孔吸附树脂法、溶剂萃取法等。

【工艺原理】

利用淫羊藿黄酮类化合物溶于乙醇的性质进行提取，通过碱溶酸沉和重结晶的方法纯化产品。

【操作过程及工艺条件】

（1）提取：取干燥药材粗粉，加入10倍量70%乙醇，浸泡12小时，回流提取，提取3次，每次1. 5小时。

（2）碱溶酸沉：提取液浓缩至干，用5%碳酸钠溶液加热反复溶解多次，趁热过滤，滤液加盐酸调pH2，放冷，滤取析出的沉淀，真空干燥，得总黄酮粗品。

（3）纯化：黄酮粗品用甲醇回流提取3次，每次20分钟，浓缩制成干膏，真空干燥，得淫羊藿总黄酮。

【生产工艺流程】

【工艺注释】

（1）纯化研究结果显示，乙醇和正丁醇提取物中总黄酮含量较高，但收率较低；85%乙醇几乎将总黄酮全部提出，但提取物中总黄酮含量较低；甲醇提取物中总黄酮含量较高，收率也较高，故甲醇可作为理想的纯化溶剂。

（2）本工艺所得总黄酮含量达58. 61%。

4.淫羊藿苷的生产工艺-1（大孔吸附树脂法）

【工艺原理】(www.xing528.com)

利用大孔吸附树脂对淫羊藿苷的吸附作用，通过30%乙醇洗除水溶性杂质，60%乙醇洗脱可解吸附淫羊藿苷，而极性小的黄酮类化合物不能被洗脱下来从而达到分离目的。

【操作过程及工艺条件】

（1）提取：将淫羊藿地上部分粉碎，用每次15倍量的60%乙醇溶液回流提取两次，过滤，合并滤液，回收溶剂，得浸提物。

（2）柱色谱分离：将AB-8型大孔吸附树脂装入色谱柱（150mm×16mm ID，BV 30ml）；浸提物上样量为10g，以30%乙醇为溶剂溶解样品并充分洗脱至基线平稳，以60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱峰对应的流出液，可得到淫羊藿苷粗品。粗品经反相色谱和重结晶，得淫羊藿苷纯品。

【生产工艺流程】

【工艺注释】

（1）本工艺采用60%乙醇溶液提取，提取液浓缩后以30%乙醇溶液溶解样品进料至大孔吸附树脂柱分离，原因是稀醇可提高淫羊藿苷的溶解度，提高进料效率，其次30%乙醇溶液不能将淫羊藿苷从大孔吸附树脂上洗脱下来。

（2）有报道，采用水煎煮法提取，提取液浓缩，上清液直接上DM 130型大孔吸附树脂，依次用水、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇洗脱，60%乙醇洗脱部分经浓缩、重结晶，同样可获得淫羊藿苷结晶。

5.淫羊藿苷的生产工艺-2（溶剂萃取法）

【工艺原理】

根据淫羊藿苷在热水中具有一定溶解度的性质采用水煎煮提取；利用淫羊藿苷在二氯甲烷中不溶的性质，通过用二氯甲烷萃取除去脂溶性杂质；利用淫羊藿苷易溶于乙酸乙酯的性质，通过乙酸乙酯萃取富集淫羊藿苷，同时除去水溶性杂质。

【操作过程及工艺条件】

（1）提取：将箭叶淫羊藿地上部分用水煎煮提取三次，每次1小时，过滤，合并提取液，得到水煎液。水煎液浓缩得浸膏，加乙醇回流提取，乙醇提取液浓缩得稀醇浸膏。

（2）萃取：上述乙醇稀溶液用二氯甲烷萃取至萃取液色浅时，再以三氯甲烷-甲醇（5∶1）萃取，最后以乙酸乙酯萃取多次。对乙酸乙酯液进行部分溶剂回收，放置析晶，过滤，得黄色粉末。

（3）重结晶：用60%乙醇重结晶数次，得淫羊藿苷纯品。

【生产工艺流程】

【工艺注释】

（1）文献报道提取淫羊藿苷方法多为有机溶剂浸提，如用甲醇或乙醇。由于甲醇毒性大，因此一般采用乙醇作为浸取剂。乙醇作为浸取剂具有选择性高、渗透性强、提取率高等优点，但乙醇具有蒸气压高、易燃易爆的缺点，对设备工艺有特殊的要求，造成生产成本较高。因此考虑用水提取淫羊藿苷，且水是价廉易得、安全无毒、无环境污染的溶剂，能大大降低生产成本。

（2）水提的缺点是提取率较低。