葡萄无菌组织培养：高倍增和高生根率

二、葡萄的组织培养

以“香妃”葡萄为例，介绍葡萄组培关键技术，具体流程如下。

1．外植体选择与处理

新梢长2～3cm时剪取茎尖和带芽茎段，在流水中冲洗2～3h后，用70%酒精浸泡30s，再用0.1%升汞处理7～8min，然后用无菌水冲洗3～4次，每次间隔5min左右，以洗净残留的升汞。在无菌条件下将材料接种到培养基中。

2．培养基制备

诱导培养基：MS＋1.0mg·L^－1BA

继代增殖和生根培养基：1／2MS＋0.2mg·L^－1IBA

上述培养基初代培养基中蔗糖为3%，继代培养基中为2%（以白砂糖替代蔗糖），pH5.8。(www.xing528.com)

3．培养效果

诱导培养：接种1周左右即有芽萌发，40d后萌芽增加3倍左右，芽均长可达5cm左右。

继代增殖和生根：诱导出的芽接入继代增殖和生根培养基，1个月后增殖5倍左右，平均生根率94%左右，平均根长可达3.5cm。

4．培养条件

温度22～25℃，光强2000lx，光照12h·d^－1。

5．试管苗的驯化

瓶苗根长3～5cm时进行炼苗移栽。将组培瓶移至温室，不揭瓶盖，1周后打开瓶口，3d后用清水洗去根部培养基，将苗移栽至用0.1%高锰酸钾消过毒的蛭石中，放入温室，搭遮阴篷，少浇水，天晴遮阴，棚内相对湿度85%左右，每10天左右浇1次营养液，并逐渐揭棚，增加光照和通风。1个月后，当苗长出新根时，移栽至草炭∶沙∶土＝1∶1∶2（体积）的花盆内。室外气候适宜时进行大田移栽，移栽成活率达70%以上。