测定啤酒中的双乙酰技能训练3

1.原理

用蒸汽将双乙酰蒸馏出来，与邻苯二胺反应，生成2，3二甲基喹喔啉，在波长335nm下测其吸光度。由于其他联二酮类都具有相同的反应特性，另外蒸馏过程中部分前驱体要转化成联二酮，因此上述测定结果为总联二酮含量（以双乙酰表示）。

2.仪器与试剂

（1）仪器 带有加热套管的双乙酰蒸馏器、蒸汽发生瓶[2000mL（或3000mL）锥形瓶或平底蒸馏烧瓶]、容量瓶（25mL）、紫外分光光度计（备有20mm石英比色皿或10mm石英比色皿）。

（2）试剂

1）4mol/L盐酸溶液（此溶液需用重蒸水配制）：按GB/T601—2002配制。

2）10g/L邻苯二胺溶液：称取邻苯二胺0.100g，溶于4mol/L盐酸溶液中，并定容至10mL，摇匀，放于暗处。此溶液必须当天配制与使用。若配制出来的溶液呈红色，则应重新更换新试剂。

3）其他试剂：有机硅消泡剂（或甘油聚醚）、重蒸馏水。

3.操作步骤

（1）蒸馏 将双乙酰蒸馏器安装好，加热蒸汽发生瓶至沸腾，通蒸汽预热后，将25mL容量瓶置于冷凝器出口接收馏出液（外加冰浴），加1～2滴消泡剂于100mL量筒中，再注入未经除气的预先冷至约5℃的酒样100mL，迅速转移至蒸馏器内，并用少量水冲洗带塞漏斗、塞盖，然后用水密封，进行蒸馏，直至馏出液接近25mL（蒸馏需在3min内完成）时取下容量瓶，达到室温后用重蒸馏水定容，摇匀。

（2）显色与测量 分别吸取馏出液10.0mL置于两支干燥的比色管中，并于第一支管中加入邻苯二胺溶液0.50mL，第二支管中不加（作为空白），充分摇匀后，同时置向暗处放置20～30min，然后向第一支管中加4mol/L盐酸溶液2mL，向第二支管中加入4mol/L盐酸溶液2.5mL，混匀后，用20mm石英比色皿（或10mm石英比色皿），于波长335nm下，以空白作参比，测定其吸光度（比色测定操作必须在20min内完成）。(www.xing528.com)

4.结果计算

试样中双乙酰的含量按式（2-3-49）计算。

X=A₃₃₅×1.2 （2-3-49）

式中 X——试样中双乙酰的含量（mg/L）；

A₃₃₅——试样在335nm波长下，用20mm比色皿测得的吸光度；

1.2——吸光度与双乙酰含量的换算系数。

注意：若用10mm石英比色皿测吸光度，则换算系数应为2.4。

所得结果保留至小数点后第二位。

5.精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。