热重与热裂解方法：五种甾醇的研究

（1）热裂解方法

称取约4 mg样品放入热裂解专用石英管，将石英管置于热裂解仪的加热丝中，按照升温程序完成裂解后，将固相微萃取头（SPME）置于自行设计的裂解瓶（见图5-7）中对裂解产物进行萃取，之后将SPME进样针插在气相色谱的进样口进行解吸附，时间为1 min，裂解产物进入气相色谱-质谱联用仪（GC/MS）进行分离与鉴定，标准谱库检索。

图5-7　裂解瓶示意图

裂解-分析条件如下:

裂解升温程序:初始温度300℃（5 s）900℃（5 s）；裂解氛围:氧氮混合气（氧气体积百分比为9%）；气体流量:2.5 mL/s；固相微萃取时间:30 min；萃取温度:70℃；解吸附时间:1 min。(www.xing528.com)

（2）热重方法

称取约20 mg待测样品放入同步热分析天平托盘中，在氮气和氮氧混合气（体积比为91︰9）氛围下，流量为50 mL/min，程序升温热分解。同步热分析实验条件:初始温度为50℃，以20℃/min的速率升温至900℃。

（3）量效关系研究

根据甾醇类化合物在烟丝中的含量及其溶解性，选择香精香料注射机向卷烟中注射其乙醚溶液。具体添加方法为:测得参比样品中游离β-谷甾醇的含量为0.22 mg/g，参比样品烟烟丝重量为0.60 g。称取0.132 88 g β-谷甾醇溶于10 mL乙醚溶液，使用香精香料注射机以10 μL/支的添加量将上述溶液均匀地注射进卷烟中，对照参比样品烟丝中β-谷甾醇的含量，得到1倍添加量的卷烟样品；用上述的方法制备2，0.75，0.5，0.25倍添加量的卷烟样品；以10 μL/支的注射量添加乙醚，制备空白卷烟样品，以上的添加倍数均为计划添加量，其实际添加值见图5-9和5-10。卷烟制备完成后存入密封袋中待用。按照上述方法制备添加胆甾醇、豆甾醇和麦角甾醇的卷烟样品。

为了验证选择的添加方式的可行性，对添加实验进行测温验证。测试卷烟化学组分添加前后的燃烧温度［30］，对比肯塔基3R4F标准卷烟，若各个添加浓度的样品卷烟燃烧温度的相对标准偏差大于标准卷烟的两倍（2×RSD3R4F），则说明化学组分的添加量过大，导致了烟支燃烧状态的改变，实验数据不可靠。

苯并[a]芘的测定按照烟草行业标准方法检测。