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花粉母细胞减数分裂涂片实验优化

时间:2023-06-26 理论教育 版权反馈
【摘要】:涂片用清洁的刀片压在花药上,向一端抹去,使花粉母细胞压出,涂抹在载玻片上成均匀而疏散的一层。固定立即将涂好的片子反过来以水平方向放入盛有铬醋酸弱液的培养皿中固定,30 min后取出玻片,流水缓缓冲洗,到固定液彻底冲净为止。

花粉母细胞减数分裂涂片实验优化

(一)用具与药品

解剖刀、载玻片、盖玻片、培养皿、铬醋酸弱液、0.02 g/mL铁矾溶液、苏木精染色液、各浓度乙醇溶液、二甲苯、中性树胶。

(二)材料

植物的花药均可,但以大的花药较为方便。

(三)操作步骤

(1)取材 自花蕾中解剖出花药,放在洁净的载玻片上(必须非常清洁,不带油脂)。

(2)涂片 用清洁的刀片压在花药上,向一端抹去,使花粉母细胞压出,涂抹在载玻片上成均匀而疏散的一层。

(3)固定 立即将涂好的片子反过来以水平方向放入盛有铬醋酸弱液的培养皿(其内侧两边各放一小玻棒,片子置其上)中固定,30 min后取出玻片,流水缓缓冲洗,到固定液彻底冲净为止。

(4)媒染 用0.02 g/mL铁矾媒染1 h,自来水洗5 min。

(5)漂洗 用蒸馏水漂洗。

(6)染色 浸入苏木精染色液染色24 h,水洗5 min。(www.xing528.com)

(7)分色 浸入0.02 g/mL铁矾溶液分色1 h,流水洗30 min。

(8)脱水 分别浸入50%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇Ⅰ、95%乙醇Ⅱ、100%乙醇Ⅰ、100%乙醇Ⅱ中进行脱水,每种试剂中停留10min。

(9)透明 分别浸入50%二甲苯、100%二甲苯Ⅰ、100%二甲苯Ⅱ中进行透明,每个浓度中停留10 min。

(10)封藏 用中性树胶封片。

染色结果:花粉母细胞分裂时期的染色体被染成蓝黑色,细胞质浅灰色或近无色。

(四)思考题

苏木精染色前和染色后均用到了铁钒溶液,其作用有什么异同?

(五)实验报告

1.你的实验结果(贴图)

2.实验总结(心得与体会)

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