【摘要】：表1合成引物基本信息续表1续表11．2．4DNA提取取100mg幼嫩叶片加入液氮充分研磨，利用CTAB的方法提取DNA，取2μlDNA用于1.2%琼脂糖凝胶电泳检测，取2μlDNA用于NanoDrop分光光度计测浓度。PCR反应程序：95℃5min，95℃30s，60℃30s，72℃30s，72℃30min，循环35次。1．2．6电泳检测96孔板中每孔加入分子量内标和甲酰胺混合液9μL，PCR产物1.0μL；95℃变性3min，上机检测。
1．2．1 植物学性状观测
参照茶树种质资源描述规范和数据标准，观测“紫娟”及其诱变后代植物学性状，重点比较叶色、叶片大小、芽叶色泽、一芽三叶百芽重等。
1．2．2 内含成分测定
花青素测定方法采用FB/LH003—2010；水浸出物测定方法采用GB/T8305—2013；茶多酚测定方法采用GB/T8313—2 0 1 8；游离氨基酸测定方法采用G B/T8314—2013；咖啡碱测定方法采用GB/T8312—2013。
1．2．3 引物的设计合成
合成引物基本信息见表1。
表1 合成引物基本信息
续表1
续表1(www.xing528.com)
1．2．4 DNA提取
取100mg幼嫩叶片加入液氮充分研磨，利用CTAB的方法提取DNA，取2μlDNA用于1.2%琼脂糖凝胶电泳检测，取2μlDNA用于NanoDrop分光光度计测浓度。
1．2．5 PCR扩增
PCR反应体系10×Buffer I：1.5μL；2.5mMdNTP1.2μL，（5μM）F/R 0.8μL，DNA1.0μL，ddH2O15μL。PCR反应程序：95℃5min，95℃30s，60℃30s，72℃30s，72℃30min，循环35次。
1．2．6 电泳检测
96孔板中每孔加入分子量内标和甲酰胺混合液（0.5∶8.5）9μL，PCR产物1.0μL；95℃变性3min，上机检测。
1．2．7 数据分析
将检测得到的原始数据文件导入到分析软件GeneMapper ID 3.2中进行分析实验结果。
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