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柱色谱法及分类介绍

时间:2023-06-30 理论教育 版权反馈
【摘要】:柱色谱法是将固定相装于柱子内形成色谱柱的色谱法。根据固定相和液体流动相极性的差别,又可分为正相分配色谱和反相分配色谱。当固定相的极性大于流动相的极性时,称为正相分配色谱或简称正相色谱;若固定相的极性小于流动相的极性时,称为反相分配色谱或简称反相色谱。

柱色谱法及分类介绍

1.按流动相的不同分类 色谱可分为气相色谱(gas chromatography,GC)、液相色谱(liquid chromatoraphy,LC)、超临界流体色谱(supercritical fluid chromatography,SFC)等。按固定相为固体或液体,气相色谱法可分为气—固色谱(GSC)和气—液色谱(GLC);液相色谱可分为液—固色谱(LSC)和液—液色谱(LLC)。

2.按色谱的操作形式分类 色谱可分为平面色谱(plane chromatography)、柱色谱(column chromatography)等。

(1)平面色谱。平面色谱是固定相被涂布于平面载板上的色谱法。平面色谱可分为以下几种。

①纸色谱法(paper chromatography):用滤纸做固定液的载体

②薄层色谱法(thin layer chromatography,简称TLC):将固定相涂覆在玻璃板上。

③薄膜色谱法(thin film column chromatography):将高分子固定相制成薄膜。

④薄层电泳法:用纸、纤维素、凝胶为支持物制成薄膜或薄层的电泳法。

上述方法都属于液相色谱法范围。(www.xing528.com)

(2)柱色谱法。柱色谱法是将固定相装于柱子内形成色谱柱的色谱法。按色谱柱的粗细,可分为填充柱色谱(packed column chromatography)法和毛细管色谱(capillary chromatography)法。

3.按色谱的分离机制分类 色谱可分为吸附色谱(absorption chromatography)、分配色谱(partition chromatography)、空间排阻色谱(steric exclusion chromatography)、离子交换色谱(ion exchange chromatography)、亲和色谱(affinity chromatography)等。

(1)吸附色谱(adsorption chromatography)。用固体吸附剂作固定相,以不同溶剂作流动相,依据样品中各组分在吸附剂上吸附性能的差别来实现分离。

(2)分配色谱(partition chromatography)。用负载在固相基体上的固定液作固定相,以不同极性溶剂作流动相,依据样品中各组分在固定液上分配性能的差别来实现分离。根据固定相和液体流动相极性的差别,又可分为正相分配色谱和反相分配色谱。当固定相的极性大于流动相的极性时,称为正相分配色谱或简称正相色谱(normal Phase chromatography);若固定相的极性小于流动相的极性时,称为反相分配色谱或简称反相色谱(reversed Phase chromatography)。

(3)离子色谱(ion chromatography)。用高效微粒离子交换剂作固定相,以具有一定pH的缓冲溶液作流动相,依据离子型化合物中各离子组分与离子交换剂上表面带电荷基团进行可逆性离子交换能力的差别而实现分离。

(4)体积排阻色谱(size exclusion chromatography)。用化学惰性的多孔性凝胶作固定相,按固定相对样品中各组分分子体积阻滞作用的差别来实现分离。

(5)亲和色谱(affinity chromatography)。以在不同基体上键合多种不同特征的配体作固定相,用不同pH的缓冲溶液作流动相,依据生物分子(氨基酸、肽、蛋白质、核酸、核苷酸、核酸、酶等)与基体上键连的配位体之间存在的特异性亲和作用能力的差别而实现对具有生物活性的生物分子的分离。

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