亲和膜在生物大分子分离中的应用

表11-3是亲和膜分离生物大分子的应用实例。

表11-3　亲和膜分离生物大分子的应用实例(www.xing528.com)

与亲和色谱相似，亲和膜在基质膜表面固载有亲和配基。由于某些生物大分子与亲和配基之间有强烈的生物特异性作用，被膜上亲和配基识别的生物分子与亲和配基发生亲和作用而被配基吸附。拟生物配基包括A蛋白、单克隆抗体、肝素、胶原、胰蛋白酶等，在亲和膜中应用最为广泛。拟生物特异配基与被分离生物分子之间发生的亲和作用模拟了生物体内特异性作用，可以在温和的淋洗条件下保持生物大分子的天然构象不被破坏，因而对于需要回收样品的制备型分离很有利。但是该类配基的制取和提纯都非常困难，价格也特别昂贵。氨基酸类配基的应用有望在一定程度上降低分离成本。生物模拟染料对酶的核苷酸键合点有亲和作用，而且价格便宜，因而在生物分子尤其是酶的分离中得到了广泛的应用。尤其值得注意的是，固载金属亲和膜（IMAM）在生物分子的分离中也得到了迅速发展。在很小的金属离子固载量下，就可得到较大的吸附容量。随着研究工作的深入，固载金属亲和膜有望用于更多的生物分子分离。亲和配基与待分离生物分子之间的缔合作用时间一般很短（大约1s），扩散系数为6nm/s的牛血清血蛋白（BSA）扩散至传统的约50μm多孔球型填料中心的配基约需40s；而亲和膜中的配基就处于膜表面上，扩散路径极短，几乎没有扩散时间，从而大大提高了亲和膜的动态容量和物料流通效率，是样品在配基上吸附的重要因素。