亚硝酸盐氮测定：N-(1-萘基)-乙二胺光度法

一、实验目的

（1）掌握水中氮的存在形态及其转化；

（2）掌握亚硝酸盐氮测定方法及注意事项。

二、实验原理

亚硝酸盐氮是氮循环的中间产物，不稳定。在不同水环境条件下，可氧化成硝酸盐氮，也可被还原成氨。

亚硝酸盐氮在水中可受微生物作用，很不稳定，采集后应立即分析或冷藏抑制生物影响。

在磷酸介质中，pH为1.8±0.3时，亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺（简称磺胺）反应，生成重氮盐，再与N－（1－萘基）－乙二胺偶联生成红色染料，在波长540nm处有最大吸收。

水样呈碱性（pH≥11）时，可加酚酞指示剂，滴加磷酸溶液至红色消失。水样有颜色或悬浮物时，加氢氧化铝悬浮液并过滤。

本法适用于饮用水、地面水、生活污水、工业废水中亚硝酸盐的测定，最低检出浓度为0.003mg／L，测定上限为0.20mg／L。

三、实验仪器

（1）分光光度计。

（2）G－3玻璃砂心漏斗。

四、实验试剂

（1）显色剂：于500mL烧杯中加入250mL水和50mL磷酸，加入20.0g对氨基苯磺酰胺，再将1.00g 2－（1－萘基）－乙二胺二盐酸盐溶于上述溶液中，转移至500mL容量瓶中，用水稀释至标线。

（2）磷酸（ρ＝1.70g／mL）。

（3）高锰酸钾标准溶液（1／5KMnO4，0.050mol／L）：溶解1.6g高锰酸钾于1 200mL水中，煮沸0.5～1h，使体积减少到1 000mL左右放置过夜，用G－3玻璃砂心漏斗过滤后，贮于棕色试剂瓶中避光保存，待标定。

（4）草酸钠标准溶液（1／2Na2C2O4，0.050 0mol／L）：溶解经105℃烘干2h的优级纯无水草酸钠3.350g于750mL水中，移入1 000mL容量瓶中，稀释至标线。

（5）亚硝酸盐氮标准贮备液：称取1.232g亚硝酸钠溶于150mL水中，移至1 000mL容量瓶中，稀释到标线。每毫升约含0.25mg亚硝酸盐氮。该溶液加入1mL三氯甲烷，保存一个月。

标定：在300mL具塞锥形瓶中，移入50.00mL 0.050mol／L高锰酸钾溶液，5mL浓硫酸，插入高锰酸钾液面下加入50.00mL亚硝酸钠标准贮备液，轻轻摇匀，在水浴上加热至70～80℃，按每次10.00mL的量加入足够的草酸钠标准溶液，使红色褪去并过量，记录草酸钠标液的用量（V2）。然后用高锰酸钾标液滴定过量的草酸钠至溶液呈微红色，记录高锰酸钾标液的总用量（V1）。

用50mL水代替亚硝酸盐氮标准贮备液，如上操作，用草酸钠标液标定高锰酸钾的浓度（C1，mol／L）：

亚硝酸盐氮的浓度（C，mg／L）

式中：C1——经标定的高锰酸钾溶液的浓度，mol／L；

　　　V1——滴定亚硝酸盐氮贮备液时，加入的高锰酸钾溶液的总量，mL；

　　　V2——滴定亚硝酸盐氮贮备液时，加入的草酸钠溶液的量，mL；

　　　V3——滴定水时，加入的高锰酸钾标液的总量，mL；

　　　V4——滴定水时，加入的草酸钠标液的总量，mL；(www.xing528.com)

　　　7.00——亚硝酸盐氮（1／2N）的摩尔质量，g／mol；

　　　50.00——亚硝酸盐标准贮备液用量，mL；

　　　0.050 0——草酸钠标准溶液的浓度，1／2Na2C2O4，mol／L。

（6）亚硝酸盐氮标准中间液：分别取适量亚硝酸盐标准贮备液（含12.5mg亚硝酸盐氮），置于250mL棕色容量瓶中，稀释至标线，可保存一周。此溶液每毫升含50微克亚硝酸盐氮。

（7）亚硝酸盐氮标准使用液：取10.00mL中间液，置于500mL容量瓶中，稀释至标线。每毫升含1.00微克亚硝酸盐氮。

（8）氢氧化铝悬浮液：溶解125g硫酸铝钾（KAl（SO4）2·12H2O）于1 000mL水中，加热至60℃，在不断搅拌下，徐徐加入55mL氨水，放置约1h后，移入1 000mL的量筒中，用水反复洗涤沉淀数次，澄清后，把上清液全部倾出，只留稠的悬浮物，最后加入300mL水，使用前振荡混匀。

五、测定步骤

1.校准曲线的绘制

在一组6支50mL的比色管中，分别加入0、1.00mL、3.00mL、5.00mL、7.00mL和10.0mL亚硝酸盐标准使用液，用水稀释至标线，加入1.0mL显色剂，密塞混匀。静置20min后，在2h内，于波长540nm处，用光程长10mm的比色皿，以水为参比，测量吸光度。

测定的吸光度减去空白吸光度后获得校正吸光度，根据回归方程（y＝bx＋a）绘制校准曲线。

2.水样的测定

当水样pH≥11时，加入1滴酚酞指示剂，边搅拌边逐滴加入（1＋9）磷酸溶液，至红色消失。

水样如有颜色或悬浮物，可向每100mL水中加入2mL氢氧化铝悬浮液，搅拌，静置，过滤弃去25mL初滤液。

取适量水样按校准曲线绘制的相同步骤测量吸光度。

六、实验数据处理

计算亚硝酸盐氮的含量：

式中：A——水样的吸光度；

　　　A0——空白吸光度；

　　　a——截距；

　　　b——斜率；

　　　d——稀释倍数；

　　　V——取样体积，mL。

七、注意事项

（1）显色剂有毒，避免与皮肤接触或吸入体内。

（2）测得的水样的吸光度值，不得大于校准曲线的最大吸光度值，否则水样要预先进行稀释。