普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。早期的显微镜仅由少数几块透镜组成，难以消除物像的像差和色差。近代的显微镜由一套精密磨制的透镜组成，已能较好地消除像差和色差，并能将物体放大1500～2000倍。
（一）实验目的
（1）掌握光学显微镜的结构、原理，学习显微镜的操作方法和保养。
（2）观察细菌的个体形态。
（3）学习生物图的绘制方法。
（二）实验内容
（1）仪器和材料 光学显微镜、擦镜纸、香柏油、标本片。
（2）实验内容及操作步骤
①做好实验前的准备工作。
②显微镜低倍镜、高倍镜的操作。先用低倍镜观察，旋转转换器换高倍镜，应注意避免与标本片相碰。
③油镜的操作。
④观察并绘制微生物个体形态简图。
⑤擦拭镜头和标本片。
⑥将所用仪器归位。
（3）显微镜的构造 显微镜分机械装置和光学系统两部分（图1-1）。
①机械装置
镜筒：镜筒上端装目镜，下端接转换器。
转换器：转换器装在镜筒的下方，其上有3～5个孔。不同规格的物镜分别安装在各孔上。
载物台：载物台为方形（多数）和圆形的平台，中央有一光孔，孔的两侧各装一个夹片，载物台上还有移动器（其上有刻度标尺），可纵向和横向移动，移动器的作用是夹住和移动标本。
图1-1 显微镜的结构
镜臂：镜臂支撑镜筒、载物台、聚光器和调节器。镜臂有固定式和活动式（可改变倾斜度）两种。
镜座：镜座为马蹄形，支撑整台显微镜，其上有反光镜。
调节器：包括大、小螺旋调节器（调焦距）各一个，可调节物镜和所需观察的物体之间的距离。调节器有装在镜臂上方或下方两种，装在镜臂上方的是通过升降镜臂来调焦距，装在镜臂下方的是通过升降载物台来调节焦距，新式显微镜多半装在镜臂的下方。
②光学系统
目镜：显微镜一般备有几个不同规格的目镜。例如，10倍（10×）、16倍（16×）。
物镜：物镜装在转换器的孔上，物镜有低倍（8×、10×、20×）、高倍（40×）及油镜（100×）。显微镜的总放大倍数为物镜放大倍数和目镜放大倍数的乘积。
聚光镜：聚光镜安装在载物台的下面，反光镜反射来的光线通过聚光器被聚集成光锥照射到标本上，可增强透明度，提高物镜的分辨率。聚光镜可上下调节，它中间装有光圈，可调节光亮度，在看高倍镜和油镜时需调节聚光镜，合理调节聚光镜的高度和光圈的大小，可得到适当的光照和清晰的图像。
反光镜：反光镜装在镜座上，有平、凹两面，光源为自然光时用平面镜，为灯光时用凹面镜。
蓝滤色片：需用滤光片时，可将滤光片放在聚光镜下可变光栏拖架上。
（4）显微镜的操作
①低倍镜的操作
a.置显微镜于固定的桌上。
b.旋转转换器，将低倍镜移到镜筒正下方，和镜筒对正。
c.打开灯光，同时用眼对准目镜，使视野亮度均匀。
d.将标本片放在载物台上，使观察的目的物置于圆孔的正中。(www.xing528.com)
e.孔径光栏的调节。通常，当孔径光栏开启到物镜出瞳的70%～80%时，就可以得到足够对比度的良好图像。要观察孔径光栏像，可取下目镜，从空目镜筒中往下看物镜出瞳。具体如图1-2所示。
图1-2 孔径光栏的调节
f.转轴式双目镜筒调节
瞳距调节：转轴式双目镜筒的瞳距标志在上表面的黑色圆形刻度板上，瞳距范围为55～75mm，以满足不同操作者的瞳距要求，使左、右目镜中的图像合并。
视度的调节：转动视度圈，使视度圈上的零刻度线与其下端的白点对齐，此时是零视度位置，对于左右眼视度不等的操作者，调节视度，可达到双眼同时看清图像的目的。
g.将粗调节器向下旋转（或载物台向上旋转），眼睛注视物镜，以防物镜和载玻片相碰。当物镜的尖端距载玻片0.5cm处时停止旋转。
h.左眼向目镜里观察，将粗调节器向上旋转，如果见到目的物，但不十分清楚，可用细调节器调节，至目的物清晰为止。
i.如果粗调节器旋得太快，使超过焦点，必须从g步重调，不应正视目镜情况下调粗调节器，以防没把握的旋转使物镜与载玻片相碰撞坏。
j.观察时两眼同时睁开（双眼不感疲劳）。单筒显微镜应习惯用左眼观察，以便于绘图。
②高倍镜、油镜的操作
a.如果用高倍镜观察目的物未能看清，可用油镜。先用低倍镜和高倍镜检查标本片，将目的物移到视野正中。
b.在载玻片上滴一滴香柏油（或液体石蜡），将油镜移至正中，使油镜头浸没在油中，刚好贴近载玻片。如果有气泡进入油层，会使像质变差，要驱出气泡，可转动转换器若干次或再加一点油，再使用调节器微微向上调（切记不能用粗调节器）即可。
c.油镜观察完毕，用擦镜纸将镜头上的油擦净，另用擦镜纸蘸少许二甲苯擦拭镜头，再用擦镜纸擦干。
（5）显微镜的维护与保养
显微镜的光学系统是显微镜的主要部分，尤其是物镜和目镜。
①避免直接在阳光下曝晒。
②避免和挥发性药品或腐蚀性酸类一起存放，碘片、酒精、盐酸和硫酸等对显微镜金属质机械装置和光学系统都是有害的。
③透镜的清洁最好用柔软的刷子或纱布，更多的较顽固的污迹可以用干净的软棉布、镜头纸或纱布蘸上无水酒精轻轻地擦去。欲从油浸物镜上擦去浸油，应使用镜头纸蘸上二甲苯轻轻擦去。同时注意不要用二甲苯清洗双目镜筒底部的入射透镜或目镜筒内的棱镜表面。纯酒精和二甲苯均易燃烧，在将电源开关打开或关闭时特别要当心着火。
④不能随意拆卸显微镜，尤其是物镜、目镜、镜筒。机械装置经常加润滑油，以减少因摩擦而受损。
⑤当显微镜不用时，要用塑料罩盖好，并贮放在干燥的地方以免发霉。
⑥为保持显微镜的性能，建议进行定期检查。
（三）微型后生动物个体形态的观察
1.仪器和材料
（1）显微镜、擦镜纸、吸水纸。
（2）酵母菌、霉菌示范片、藻类培养液及活性污泥混合液（内有原生动物和微型后生动物）。
2.实验内容和操作方法
（1）严格按显微镜的操作方法，用低倍镜和高倍镜观察酵母菌和霉菌的示范片，绘制形态图。
（2）用压滴法制作藻类、原生动物和微型后生动物的标本片。制作方法如图1-3所示。取一片干净的载玻片放在实验台上，用一支滴管吸取试管中藻类培养液于载玻片的中央，用干净的盖玻片覆盖在液滴上（注意不要有气泡）即成标本片。用低倍镜和高倍镜观察。
（3）用压滴法观察活性污泥中的原生动物和微型后生动物。
图1-3 压滴法制作标本的过程
（四）思考题
（1）简述显微镜包括哪些部分？
（2）使用油镜前为什么要先用低倍镜和高倍镜检查？
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