化学发光反应类型-仪器分析成果

根据反应物存在的聚集状态不同，化学发光反应可分为气相、液相或固相化学发光。若化学发光在两个不同相间进行，称为异相化学发光，如气体通过固体表面或液-固界面上进行的发光反应。以液相化学发光的应用范围最广。

1.液相化学发光

鲁米诺、光泽精、没食子酸等发光物质都可用于影响化学发光分析。例如，鲁米诺在碱性溶液中被氧化剂氧化，于425nm处产生辐射（蓝光）。

鲁米诺在刑侦过程中的应用：鲁米诺早在1853年就被合成出来了。1928年，化学家首次发现这种化合物有一个奇妙的特性，它被氧化时能发出蓝光。几年以后，就有人想到利用这种特性去检测血迹。血液中含有血红蛋白，我们从空气中吸入的氧气就是靠这种蛋白质输送到全身各部分的。血红蛋白含有铁，而铁能催化过氧化氢的分解，让过氧化氢变成水和单氧，单氧再氧化鲁米诺让它发光。在检验血痕时，鲁米诺与血红素（Hemoglobin，血红蛋白中负责运输氧的一种蛋白质）发生反应，显出蓝绿色的荧光。这种检测方法极为灵敏，能检测只有百万分之一含量的血，即使滴一小滴血到一大缸水中也能被检测出来，由此可知犯罪分子是多么难以把现场清洗干净了。

2.气相化学发光

O3氧化NO和原子氧氧化CO、SO2等化学发光反应均为气相化学发光的典型代表。例如，NO和O3的气相化学发光反应具有较高的化学发光效率，其反应过程为

3.异相化学发光(www.xing528.com)

在含有罗丹明B和没食子酸（M）的硅胶上，O3与没食子酸反应生成高能中间体A*，然后将能量转移给罗丹明B接受体而发光，该反应用于O3含量测定。

4.生物化学发光

萤火虫素与三磷腺苷ATP反应，在萤火虫素酶E与Mg2+存在时，生成萤火虫素与一磷腺苷AMP的复合物和焦磷酸镁，然后复合物与氧发生化学发光反应，φCL接近于1.0。该体系可测定2×10-7mol∙L-1的ATP，这相当于一个细菌的ATP含量，灵敏度高，选择性很好。

细菌发光也可用于发光分析。在发光细菌的荧光素酶E催化下，还原型的黄素单核苷酸（FMNH2）在八碳以上长链脂肪醛参与下，被O2氧化，产生化学发光。

由于氧化型的黄素单核苷酸（FMN）可与酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）发生下列反应，因此将两个化学发光反应偶合，可灵敏地测定样品中的NADH。