填充柱固定相在仪器分析中的应用

上述吸附剂和固定液均可作为填充柱固定相。下面介绍固定液的制备、填充和老化。

1.固定相的制备

在制备液体固定相的过程中，载体的粒度通常选用80～100目级分。有机溶剂的选用应遵循三原则：不与固定液起化学反应；能和固定液形成无限互溶体系，当加入载体后不会出现分层现象；沸点适当，有一定的挥发度。制备液体固定相的方法有如下两种：

（1）蒸发法

称取需要量的固定液在选定的有机溶剂中溶解，制成涂渍溶液。为了使固定液完全溶解，可以将溶液置于热水浴上加热，注意控制温度低于所用溶剂沸点以下20℃。待固定液完全溶解后，缓缓倒入经预处理和过筛备用的载体。在适当温度下轻轻摇动容器，让其中溶剂慢慢地自然挥发完全后即涂渍完毕。如果希望加快工作进度，也可以使用旋转蒸发仪在适当的温度下除去有机溶剂。在涂渍过程中应注意不能猛烈搅动，以免损伤载体。有机溶剂用量一般为载体体积的2倍。

（2）回流法(www.xing528.com)

将已知量的固定液和溶剂置于圆底烧瓶内，上接冷凝管冷凝装置，然后加热回流0.5h，当固定液完全溶解后缓缓加入载体，继续加热回流1.5～2h。最后将其倒入烧杯中，置通风橱内，让溶剂自然挥发至干即可。该方法适用于溶解性能较差的高温固定液的涂渍。

2.固定相的填充

固定相填充质量的好坏直接影响填充柱的柱效。一根填充质量较高的色谱柱，通常其理论塔板数应该达到2000～3000/m。填充密度方法有：加压法、减压法和手工填充法等（可参阅有关色谱专业论著）。

3.填充柱的老化

新制备的填充柱在使用前必须经过老化处理，以便把柱内的残存溶剂低分子量固定液以及低沸点杂质除去，使固定液在载体表面涂渍得更均匀牢固。老化方法：在室温下将填充柱的入口端与进样器相连，出口端与检测器断开。然后通气，调节载气流速10～20mL/min，再以程序升温的方法缓慢将温度升至比使用温度高20℃，并在此温度下老化4～8h。