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实验材料及制备方法-分子微生物学实验指导

时间:2023-11-02 理论教育 版权反馈
【摘要】:10% SDS电泳级SDS 10.0g加ddH2O,68℃助溶,浓盐酸调pH至7.2,定容至100mL。5×Tris-Gly电泳缓冲液Tris 15.1g,甘氨酸94g,10%SDS 50mL加ddH2O溶解,定容至1000mL。10%过硫酸铵1g的AP加ddH2O至10mL。溶液分装保存在4℃,不超过2周。2×SDS电泳上样缓冲液1mol/L的Tris-HCl1mL,1mol/L二硫苏糖醇2mL,SDS 0.4g,甘油2.0mL,0.1%溴酚蓝2.0mL,ddH2O 3mL。考马斯亮蓝脱色液 甲醇、冰乙酸、ddH2O,以5∶1∶4配制而成。

实验材料及制备方法-分子微生物学实验指导

(1)30%储备胶溶液 电泳丙烯酰胺(Acr)29.0g,亚甲基双丙烯酰胺(Bis)1.0g,混匀后加去离子双蒸水,37℃搅拌溶解,定容至100mL,存于棕色瓶室温备用。

(2)1.5mol/L Tris-HCl(pH 8.8)Tris 18.17g加ddH2O溶解,浓盐酸调pH至8.8,定容至100mL。

(3)1mol/L Tris-HCl(pH 6.8)Tris 12.11g加ddH2O溶解,浓盐酸调pH至6.8,定容至100mL。

(4)10% SDS电泳级SDS 10.0g加ddH2O,68℃助溶,浓盐酸调pH至7.2,定容至100mL。

(5)5×Tris-Gly电泳缓冲液(pH 8.3)Tris 15.1g,甘氨酸94g,10%(质量体积分数)SDS 50mL加ddH2O溶解,定容至1000mL。

(6)10%过硫酸铵(AP)1g的AP加ddH2O至10mL。溶液分装保存在4℃,不超过2周。(www.xing528.com)

(7)TEMED(NNN′N′-四甲基乙二胺)。

(8)2×SDS电泳上样缓冲液(10mL)1mol/L的Tris-HCl(pH 6.8)1mL,1mol/L二硫苏糖醇(DTT)2mL,SDS 0.4g,甘油2.0mL,0.1%溴酚蓝2.0mL,ddH2O 3mL。

(9)0.25%考马斯亮蓝R-250染色液(1L)考马斯亮蓝(R-250)2.5g,甲醇500mL,冰乙酸100mL,ddH2O 400mL,过滤去除未溶解颗粒。

(10)考马斯亮蓝脱色液 甲醇、冰乙酸、ddH2O,以5∶1∶4配制而成(1L)。

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