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种子活力的测定方法-TTC溶液染色实验

时间:2023-11-02 理论教育 版权反馈
【摘要】:种子活力的测定本实验中种子活力的测定采用TTC法。水稻种子要去壳,豆类种子要去种皮,然后沿种胚中央准确切开,将其中的一半用TTC溶液完全浸没染色,另一半在沸水中煮5min,再做同样的染色处理,作为对照观察。③将准备好的种子浸于TTC试剂中,置于恒温箱中保持1-6h进行染色。吸去种子表面的TTC溶液,用肉眼或放大镜检查胚部染色情况。

种子活力的测定方法-TTC溶液染色实验

(1)种子活力的测定

本实验中种子活力的测定采用TTC法。其原理为TTC的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲臜(TTF)。用TTC的水溶液浸泡种子,使之渗入种胚的细胞内,如果种胚具有较强生活力,呼吸作用强,其中的脱氢酶就可以将TTC 作为氢受体使之还原成为三苯甲臜而呈红色;如果种胚死亡便不能染色;种胚生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色,因此,可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的活力。测定步骤如下:

①将种子用温水(30℃)浸泡2-6h,使种子充分吸胀。

②随机取种子2 份,每份100 粒。水稻种子要去壳,豆类种子要去种皮,然后沿种胚中央准确切开,将其中的一半用TTC溶液完全浸没染色,另一半在沸水中煮5min,再做同样的染色处理,作为对照观察。

③将准备好的种子浸于TTC试剂中,置于恒温箱(25-35℃)中保持1-6h进行染色。

④染色结束后,要立即进行鉴定,因放久了会退色。吸去种子表面的TTC溶液,用肉眼或放大镜检查胚部染色情况。凡胚部呈红色的种子具有生命力,并能萌发;胚部呈淡红色的种子,其生命力较弱,但有的可以萌发。胚部未染色的种子,为丧失生命力的死种子,不能萌发,统计结果,并检查对照样品是否染色。

小粒种子经染色后,可加几滴乳酸苯酚溶液,经10-30min 后,再进行鉴定,这样易于看清胚的染色情况。用于不同种子生命力的测定,其试剂浓度、染色时间、浸泡时间也不同。

⑤计算。

(2)植物种子萌发率测定

①先在所用容器中(瓷盘、培养皿),铺一层经淘洗并消毒过的粗沙,上面放一层滤纸或纱布,铺成发芽床。发芽床保持干净,最好经过消毒。(www.xing528.com)

②将试验种子分成4组,每组100粒或50粒(根据种子大小),分别放入4个发芽床内。粒与粒之间要保持一定距离,通常不能小于种子本身大小,以防带病种子发霉感染。发芽床放在温箱内或温度适宜的地方。

③每个发芽床要注明种子名称、开始试验日期、种子粒数。定期观察、记录萌发情况。

④种子的萌发率,是指在最适宜的发芽条件下,发芽种子占所测种子的百分比

⑤计算。

种子的发芽率及发芽势的计算应取供作发芽试验的几组样品的平均值。

【思考题】

(1)分析种子萌发所需的内因和外部条件。

(2)为什么说胚是种子的重要部分?

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