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正常人体学基础:研究组织结构的方法

时间:2023-11-04 理论教育 版权反馈
【摘要】:应用光学显微镜观察组织切片是最常用的方法。最常用的切片染色是苏木精和伊红染色,简称HE染色。苏木精为碱性染料,组织结构与碱性染料亲和力强者称嗜碱性。除了HE染色法外,还有许多种染色方法,能特异性地显示某种细胞、细胞外基质成分、或细胞内的某些结构。在电镜下所见的结构称超微结构。

正常人体学基础:研究组织结构的方法

(一)一般光学显微镜

1.一般组织切片 机体各部分的微细结构,必须用显微镜才能进行观察。应用光学显微镜观察组织切片是最常用的方法。它要通过取材、固定、脱水、石蜡包埋等步骤,然后用切片机切成5~10 µm的组织切片,经脱蜡、染色以增加反差,再经透明封固后即可在光镜下观察,所见结构称光镜结构。最常用的切片染色是苏木精和伊红染色,简称HE染色。苏木精将细胞核染成紫蓝色,伊红将细胞质染成粉红色。苏木精为碱性染料,组织结构与碱性染料亲和力强者称嗜碱性。伊红为酸性染料,与酸性染料亲和力强者,称嗜酸性。若与两者亲和力都不强,则称嗜中性。

除了HE染色法外,还有许多种染色方法,能特异性地显示某种细胞、细胞外基质成分、或细胞内的某些结构。例如,用硝酸银可将神经细胞染成棕黑色(此为镀银染色法)。

2.冷冻切片 为了更好地保存细胞内酶的活性或缩短切片制作过程,组织块也可不予固定,而立即投入液氮(-196℃)快速冻结,用恒冷切片机制成冷冻切片,再经过染色并观察。

3.其他切片 液态标本可制成涂片(如血涂片、精液涂片)。疏松的组织可撕成薄片铺在玻片上制成铺片。坚硬的组织(如骨和牙)则需磨成薄片称磨片,再经染色后观察。(www.xing528.com)

(二)电子显微镜技术

电子显微镜的发明和使用,使组织胚胎学研究发生了深刻变化。光镜分辨率为0.2 µm,放大倍数约为1 000倍,而电镜的分辨率为0.2 nm,比光镜高1 000倍,可放大几万倍至几十万倍,因此电镜能观察到更微细的结构。在电镜下所见的结构称超微结构。

1.透射电镜 主要用于观察细胞内部结构,标本制备比光镜的要求更严格。

2.扫描电镜 主要用于观察组织或细胞表面的微细结构。在扫描电镜下观察,可以呈现富于立体感的表面图像,如细胞表面的微绒毛、纤毛和细胞伸出的伪足等。

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