活性氮氧化物溶液和PAM对HaCaT细胞的选择性杀伤

在6.2节已经得到了化学方法配制的不同浓度的和溶液及其组合对HaCaT 细胞的细胞毒性，这里进一步研究了这些化学方法配制的RONS溶液对A875细胞的毒性。不同浓度的及二者的组合对A875细胞的毒性如图6.4.4所示。

图6.4.4　不同浓度的N和N及它们的特定组合对A875细胞的细胞毒性

n.s.表示无显著性差异，* P＜0.05；** P＜0.01；***P＜0.001

由图6.4.4可以看到，与HaCaT 细胞的细胞毒性实验结果类似，和溶液及它们的组合对A875细胞同样几乎没有细胞毒性。

H2O2溶液以及H2O2与和混合溶液对A875细胞的毒性如图6.4.5所示。由图6.4.5（a）可以看到，H2O2溶液对A875细胞的毒性也存在着明显的剂量依赖效应，但是两种细胞在含有相同浓度的H2O2培养基中培养24h后，A875细胞的存活率比HaCaT 细胞的存活率要高。例如，当细胞培养基中H2O2浓度为400μmol/L时，A875细胞的存活率仍然接近40%，但相同情况下HaCaT 细胞的存活率已经低于10%（见图6.2.2（a））。同样地，尽管H2O2溶液中加入会增加对A875细胞的毒性，但是在相同条件下仍然是A875细胞的存活率要高于HaCaT 细胞的存活率，如图6.4.5（c）所示，200μmol/LH2O2加上2mmol/L的才能将大部分A875细胞杀死。

图6.4.5　H2O2溶液、H2O2与N的混合溶液、H2O2与N的混合溶液对A875细胞的细胞毒性实验结果(www.xing528.com)

n.s.表示无显著性差异，*P＜0.05；** P＜0.01； ***P＜0.001

将图6.4.4和图6.4.5的实验结果与6.2节中图6.2.1和图6.2.2中相同情况下RONS溶液对HaCaT 细胞毒性的结果进行对比可以发现，不同浓度的和溶液及它们的组合，不仅不能选择性杀死癌细胞A875，反而对正常的HaCaT细胞的毒性更强。例如，当浓度为400μmol/L的H2O2溶液单独作用时，HaCaT细胞的存活率已经下降到了10%以下，如图6.2.2（a）所示，而相同情况下A875细胞的存活率在40%左右，如图6.4.5（a）所示。

HaCaT 细胞和A875细胞在用N-APPJ处理不同时间得到的PAM 中培养24h后的细胞存活率如图6.4.6（a）所示，对应的PAM 中和的浓度如图6.4.6（b）所示。

图6.4.6（a）所示结果表明，两种细胞在PAM-5中培养24h后，细胞的存活率都在90%以上，而且相互之间无显著性差异。然而，在PAM 对应的NAPPJ处理时间增大后，虽然两种细胞的存活率都会下降，但是A875细胞的存活率却始终高于HaCaT 细胞的。例如，当用PAM-20 处理两种细胞时，HaCaT 细胞几乎全部死亡，但是A9875的存活率却仍然在30%左右。这说明相同条件下PAM 不仅不能选择性杀死A875细胞，反而对HaCaT 细胞的毒性更大。图6.4.6（b）的结果显示PAM 中和的浓度随着等离子处理时间的增加而增加，在PAM-20中，和的浓度分别在200μmol/L、75μmol/L和30μmol/L左右。

图6.4.6　PAM 对HaCaT 细胞和A875细胞的细胞毒性以及PAM 中H2O2、N和N的浓度变化情况

n.s.表示无显著性差异，*P＜0.05；** P＜0.01；***P＜0.001