FcRn延长维持IgG水平，Wnt信号免疫调控

大量研究证实，FcRn 还可以通过再循环和转胞吞作用大幅度延长IgG的半衰期，由于血管内皮细胞具有内化血清蛋白的功能，且血管内皮细胞表达的FcRn 具有保护血清中IgG 不被代谢降解、延长IgG 在血清中存在的半衰期的作用，因此目前普遍认为血管内皮是FcRn 调节代谢最重要的部位。Montoyo 等研究表明，维持小鼠内源性IgG 水平的FcRn 位点主要存在于内皮细胞和造血细胞上，敲除FcRn 后，IgG 在血清中的代谢速率明显提高，血清中IgG 水平浓度显著降低。

1.5.4.1　BCG 感染巨噬细胞不同时间和不同CFU 后FcRn 的表达

为了探究BCG 感染后FcRn 的表达变化规律，利用qRT-PCR 和Western Blot 对BCG 感染巨噬细胞不同时间和不同CFU 后FcRn 的表达水平进行检测，如图1-8 所示，不同时间及不同感染复数BCG 感染细胞后FcRn 的含量均高于对照，并且在感染巨噬细胞12 h 时，细胞中FcRn 的表达量最高。与此同时，利用siRNA-FcRn 处理BCG 诱导的FcRn 后，通过免疫荧光观察不同处理组内FcRn 的表达情况。由图1-9 可以看出，BCG 感染可显著上调RAW264.7 细胞FcRn 的表达，且FcRn 干扰结合BCG 处理组中FcRn 的表达极显著低于BCG 单独处理组。由此可以看出，BCG 感染后可以诱导细胞内FcRn 的表达。既然FcRn 可以转运IgG, 那么探讨BCG 感染后细胞内IgG 的水平将对体液免疫具有重要意义。

图1-8　BCG 感染巨噬细胞不同时间和不同CFU 时FcRn 的表达规律变化

A，C，D. BCG 感染巨噬细胞不同时间FcRn 的mRNA 和蛋白水平表达规律变化；B，E. BCG 感染巨噬细胞不同浓度FcRn 蛋白水平的表达变化

图1-9　免疫荧光检测不同处理组中FcRn 的表达及定位(www.xing528.com)

1.5.4.2　BCG 感染巨噬细胞内IgG 表达水平变化

既然FcRn 与IgG 结合依赖于pH 值，为了探究BCG 感染巨噬细胞中IgG 的表达变化规律，利用Western Blot 对BCG 感染巨噬细胞不同时间后IgG 的表达水平进行检测，检测结果显示感染6 h 和12 h 时，细胞中IgG 重链和轻链的表达量出现下调，随着感染时间的不断延长，在感染24 h 和48 h时，基于细胞培养液的pH 值进一步下降，细胞中IgG 重链的表达含量逐渐升高，而IgG 轻链的表达量虽有回补趋势，但仍低于对照组（图1-10）。

图1-10　BCG 感染巨噬细胞不同时间IgG 表达变化规律

A. IgG 重链和轻链蛋白的表达水平；B. IgG 重链蛋白表达灰度分析结果；C. IgG 轻链蛋白表达灰度分析结果

综上所述，结核分枝杆菌通过抑制众多免疫杀伤机制的激活可在宿主细胞内长期存活。在漫长的潜伏期中，结核分枝杆菌利用一系列效应蛋白来增强其在宿主内的生存能力。尽管潜伏性结核感染可持续数十年且不会恶化，但受感染的个体很可能会遭受结核分枝杆菌的持续影响，如代谢紊乱、免疫失衡和微生物群失调。尽管全世界科学家殚精竭虑做出了不懈的努力，但是截至目前仍有许多问题仍悬而未决，因此彻底根除和消灭结核病这一目标任重而道远！