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细胞重组技术:从活细胞中分离与重组细胞器的一种实验技术

时间:2023-11-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:细胞重组技术是指从活细胞中将细胞器及其组分分离出来,再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组合,使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术。细胞重组对研究真核细胞的核质关系、细胞器功能与相互作用关系、细胞器的组装、自我装配机制,以揭示细胞的起源与进化机制具有重要意义。

细胞重组技术:从活细胞中分离与重组细胞器的一种实验技术

细胞重组技术是指从活细胞中将细胞器及其组分分离出来,再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组合,使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术。细胞重组对研究真核细胞的核质关系、细胞器功能与相互作用关系、细胞器的组装、自我装配机制,以揭示细胞的起源与进化机制具有重要意义。结合基因转移技术,细胞重组可人为地使细胞表达新的性状和产生新的产物,实现掌握细胞、利用细胞、改造并进而创造出具有特定性状和功能的工程细胞。重组的主要方式有三种:①胞质体与完整细胞的重组(胞质杂种);②微细胞与完整细胞的重组(微细胞异核体),微细胞指的是含有仅有一条或几条染色体,并带有薄层细胞质的微核;③胞质体与核体的重组(重组细胞)等,而核体又称小细胞,具有细胞核,带有薄层细胞质。要实现细胞器的任意组装,首先需要制备、分离细胞器,通过显微操作技术可以将它们进行组装,如细胞核移植到另一个细胞,或者细胞核(细胞质)进行交换,可能创造出无性杂交生物的新品种,实现细胞重组。分离细胞主要根据待分离细胞本身的一些性质,选择合适的分离方法。这些性质主要有细胞的大小、密度、表面电荷、表面标志、细胞中一个或多个成分的荧光强度、与介质的吸附作用等存在差异,来达到分离的目的。分离的方法主要有通过大小、密度、电荷差异分离的技术及通过表面标记分离技术。磁活化细胞筛选技术(magnetic activated cell sorting,MACS)是近年发展起来的细胞分离新技术,由于其具有简便、快速、分离容量大、所得细胞活性高、分离纯度高等优点及相对较低的价格,现已成为各大实验室首选的纯化细胞方法。(www.xing528.com)

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