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离子液体在核酸和蛋白质分离中的应用:一个综述

时间:2023-11-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:反胶团萃取是近年发展起来的分离和纯化生物物质的新方法。应用反胶团可实现对大豆蛋白[71]、血红蛋白[72]、活性酶[73]、质粒DNA[74,75]的萃取。Ono等[81]采用表面活性剂分子萃取分离蛋白质时,增强蛋白质与表面活性剂的相互作用可显著提高萃取能力。也可以采用磁性技术,将磁珠引入微芯片,通过磁珠将DNA萃取分离[86]。

离子液体在核酸和蛋白质分离中的应用:一个综述

反胶团萃取是近年发展起来的分离和纯化生物物质的新方法。它是表面活性剂分子溶于非极性溶剂中自发形成的聚集体,其中表面活性剂的极性头朝内而非极性头朝外与有机溶液接触,胶团内可溶解少量水而形成微型水池蛋白质、核酸、氨基酸等生物分子溶解在其中,由于胶团的屏蔽作用,这些生物物质不与有机溶液直接接触,起到保护生物物质活性的作用,从而实现生物物质的溶解和分离。应用反胶团可实现对大豆蛋白[71]、血红蛋白[72]、活性酶[73]、质粒DNA[74,75]的萃取。采用丁二酸二异辛酯磺酸钠(AOT)/异辛烷反胶束体系可以萃取低温脱脂豆粕中的蛋白质[76],而采用NaOH皂化P204/正辛烷微乳体系可萃取分离大豆蛋白[77]

胡松青等[78]采用PEG/磷酸盐双水相系对牛血清白蛋白(BSA)进行了萃取研究,并考察了双水相系统成相浓度、外加盐NaCl等条件下BSA在两相间的分配情况。邓凡政等[79]亲水性离子液体BmimBF4与KH2PO4形成的双水相体系对BSA进行了萃取研究,结果表明,BSA在富含离子液体相中的分配系数更高,这种离子液体22水相体系可实现对BSA的萃取分离。

金谷等[80]采用浊点萃取法(以Tween 80作为溶剂),以高分子试剂聚乙烯醇缩对甲酰基苯基偶氮变色酸(PV·FPNS)作为萃取剂,对牛血清蛋白(BSA)和牛血红蛋白(BHA)的萃取进行了研究,结果表明,两种蛋白质都能被定量萃取。Ono等[81]采用表面活性剂分子萃取分离蛋白质时,增强蛋白质与表面活性剂的相互作用可显著提高萃取能力。(www.xing528.com)

芯片提取和电泳分离技术也被用于DNA的分离纯化[82-84],采用硅石、玻璃、离子交换树脂及经过修饰的磁珠或高分子聚合物等作为DNA的固相载体,在微芯片中进行DNA的提取或电泳分离。采用Silicon-PDMS-Glass微芯片,以KI作为键合反应试剂可以实现DNA的萃取分离[85]。也可以采用磁性技术,将磁珠引入微芯片,通过磁珠将DNA萃取分离[86]。采用多孔氧化硅载体作为DNA的固相载体,对DNA进行微芯片提取,由于多孔氧化硅具有大的比表面积,因此,可以显著提高DNA的提取产率[87]

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