离子液体在核酸蛋白质分离中的应用

基于以上获得的初步结果，实验中对离子液体BtmsimPF6萃取血红蛋白进行了研究。将3mL血红蛋白（400ng/μL）与1.0mL离子液体BtmsimPF6加入到5mL离心管中，剧烈震荡30min后，静置5min。如图4-2所示。萃取前离子液体相为浅黄色，血红蛋白溶液为淡黄色；而萃取后，上层水相颜色明显变浅，颜色几乎消失，下层离子液体相的颜色由浅黄色变成深红色。这个明显的颜色变化表明血红蛋白从水溶液中进入了离子液体相。

实验中具体考察了以上三种离子液体对血红蛋白的萃取情况，如图4-3所示。

图4-2　水—离子液体两相体系萃取血红蛋白照片

（血红蛋白浓度为400ng/μL）(www.xing528.com)

图4-3　血红蛋白水溶液的UV-Vis光谱

a—萃取前　b—BmimPF6萃取后　c—BtmsimPF6萃取后　d—BBimPF6萃取后

血红蛋白浓度和体积分别为100ng/μL，3mL；IL体积为400μL；萃取时间为30min。萃取前，血红蛋白水溶液（100ng/μL）在406nm处的吸光度为0.68，采用三种离子液体直接对水溶液中的血红蛋白进行萃取后，发现血红蛋白水溶液在406nm的吸光度都有所降低，但是在相同的条件下，其萃取能力明显不同，BmimPF6、BBimPF6、BtmsimPF6对血红蛋白的萃取率分别为20%、93%、98%。结合实验中合成的三种离子液体的结构及疏水性顺序发现，随着阳离子侧链长度的增大其疏水性增强，血红蛋白的萃取率也明显增大，表明血红蛋白倾向于溶解在疏水性的离子液体中。因此，本实验中选择离子液体BtmsimPF6作为萃取溶剂，对血红蛋白的萃取进行了详细研究。