豆芽中4-氯苯氧乙酸钠和6-苄氨基腺嘌昤的快速检测

案例导入

案例1：2019年8月，闽北两家超市的豆芽中检出4-氯苯氧乙酸钠。不合格样品为：在南平市延平区亿发福乐福生鲜超市抽检的黄豆芽检出4-氯苯氧乙酸钠（以4-氯苯氧乙酸计），在南平市星光量贩超市有限公司抽检的无公害绿豆芽检出4-氯苯氧乙酸钠（以4-氯苯氧乙酸计）。

案例2：2020年6月20日，海口市市场监督管理局美兰分局发布关于不合格食品核查处置情况的公告，海口美兰符积虎蔬菜蛋摊销售的黄豆芽被检出6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）超标。按照2020年国家食品安全抽样监测工作计划有关要求，美兰分局于2020年03月10日对海口美兰符积虎蔬菜蛋摊销售的黄豆芽进行了海南省食品安全抽样检测。经检测发现，黄豆芽中问题项目为6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）项目不符合要求，检测结论为不合格。

那么什么是4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤？4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤究竟有什么危害？如何采用快速检测方法检测4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤呢？

豆芽是深受广大消费者喜爱的蔬菜之一，其富含维生素C、氨基酸、视黄醇、膳食纤维等对人体有益的成分，而且脂肪、胆固醇含量很低，适合“三高”人群食用，有利于调节不健康的膳食结构。而且其在生长过程中将绿豆中的大部分蛋白质分解为氨基酸，更加有利于人体的吸收。

4-氯苯氧乙酸钠（4-CPANa）俗称防落素，是一种植物生长调节剂。主要用于防止落花落果、抑制豆类生根等，并能调节植物株内激素的平衡。但其对人体有一定积累毒性。豆芽中检出4-氯苯氧乙酸钠可能是由于豆芽生产商在生产过程中为了抑制豆芽生根，提高豆芽产量而违规使用。国家食品药品监督管理总局、农业部、国家卫生和计划生育委员会关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄氨基腺嘌呤等物质的公告（2015年第11号）规定豆芽生产经营过程中禁止使用4-氯苯氧乙酸钠。

6-苄氨基腺嘌呤（6-Benzylaminopurine，简称6-BA）白色针状结晶，难溶于水，微溶于乙醇，可溶于酸性及碱性溶液中，属于第一个人工合成的细胞分裂素，具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质分解，保绿防老的作用。目前常用于蔬菜，水果的保鲜和无根豆芽的培育。它在植物体内含量甚微但它对植物的生长发育具有显著的影响，其主要作用是促进细胞的分裂、促进侧芽的发育、抑制衰老等，具有诱导同化物向施用部位定向运输的作用。它在细胞分裂素中活性最高。6-BA作为促长剂和保鲜剂的主要成分，已在国内外进入应用阶段。人体通过食物链摄入过多6-BA，会刺激食道、胃黏膜，造成损伤，出现恶心、呕吐等现象。下面介绍豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤残留的快速检测方法。

1.范围

本规程规定了豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤残留的快速检测方法。本规程适用于豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤的快速检测。本方法检出限为1.0 mg/kg（4-氯苯氧乙酸钠）、0.5 mg/kg（6-苄氨基腺嘌呤）。

2.原理

本方法应用了竞争抑制免疫层析的原理。样本中的4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体与检测卡中检测线（T线）上的4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤-BSA偶联物的免疫反应，从而导致检测线颜色的变化。通过检测线（T线）与质控线（C线）颜色深浅比较，对样品中的4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤进行定性判定。

3.仪器设备

研钵、天平。

4.试剂和耗材

4-氯苯氧乙酸钠、6-苄氨基腺嘌呤残留快检试剂盒（胶体金快速检测卡/条，以及配套试剂）、样本稀释液（PBS缓冲溶液，由胶体金检测卡/条配套提供，或按照其说明书配制）、滴管、金标微孔（由胶体金检测卡/条配套提供）、离心管（0.5 mL）。

5.检测步骤

（1）试样制备

采集10 g具有代表性的样品，称取适量豆芽根部2～3 cm的待测样品于研钵中，用研钵棒充分研磨至汁水渗出。

（2）试样前处理

取出200 μL汁水于0.5 mL离心管中，再加入200 μL样品稀释液，充分振荡混勻10s，待测。

（3）测定

从包装袋中取出快速测卡/条（开封后在一小时内尽快使用），平放于桌面，用滴管吸取待检样品溶液，垂直滴加4滴（约120 μL）于金标微孔中，2 min后用滴管将微孔中的金标待检液充分混勻，将金标微孔中待检液全部转移到检测卡的加样孔中，在规定时间内读取。

6.结果判定

通过对比质控线和检测线的颜色深浅进行结果判定。由于长时间放置会引起检测线颜色的变化，需在规定时间内进行结果判定。采用目视法对结果进行判定，示意图如图2-7，结果判定建议按照试剂盒说明书。

（1）无效

质控线（C线）不显色，无论检测卡/条（T线）是否显色，表示操作不正确或检测卡己效。

（2）阴性结果

质控线（C线）显色，检测线（T线）比质控线（C线）显色深或检测线（T线）与质控线（C线）显色基本一致，判为阴性。

（3）阳性结果

质控线（C线）显色，检测线（T线）不显色或显色明显浅于质控线（C线），判为阳性。

图2-7　试纸条目视判定示意图（消线法）

7.限量要求

依据国家食品药品监督管理局、农业部、国家卫生和计划生育委员会关于豆芽生产过程中禁止使用6-苄氨基腺嘌呤等物质的公告（2015年第11号），豆芽中禁用4-氯苯氧乙酸钠和6-苄氨基腺嘌呤。

8.注意事项

①请不要混用不同批号的试剂盒产品。

②不能用水或其他液体作为阴性样品检测对照。

③本检测结果仅供参考，4-氯苯氧乙酸钠阳性样确证方法为SN/T 3725-2013《出口食品中对氯苯氧乙酸残留量的测定》，6-苄氨基腺嘌呤阳性样确证方法为GB/T 23381-2009《食品中6-苄氨基腺嘌呤的测定高效液相色谱法》。

目标检测

一、单选题

1.采用邻甲氧基苯酚呈色检测法检测大米的新陈时，如果是（），则溶液上部应在1～3 min溶液内呈白浊，在溶液上部应显深红褐色。

A.陈米

B.新米

2.粮食中存在（），新粮中该酶的活力较高，陈粮中该酶由于变性而丧失活力。

A.多酚氧化酶

B.脂肪氧化酶

C.过氧化氢酶

D.淀粉酶

3.米粉、粉丝和腐竹中发现的甲醛次硫酸氢钠，俗称（）。

A.石膏

B.吊白块

C.烧碱

D.滑石粉

4.醋酸铅试纸法检测馒头、凉皮、粉条、腐竹、米粉等食品的吊白块时，如果试纸变为（），则证明测试样品中含有吊白块。

A.红色

B.绿色

C.蓝色

D.棕黑色

5.采用姜黄色素比色法快速测定粽子等食品中硼砂时，其反应产物呈（），得到溶液颜色的深浅与样品中硼砂含量成正比。

A.黑褐色

B.蓝紫色(https://www.xing528.com)

C.绿色

D.红色

6.采用姜黄色素比色法快速测定粽子等食品中硼砂时，其检出限是（）。

A.25 mg/kg

B.10 mg/kg

C.2.5 mg/kg

D.2.0 mg/kg

7.呕吐毒素，又称（），因其引起猪呕吐而得名，国际上普遍将其定义为致癌物。

A.脱氧雪腐镰刀菌烯醇

B.禾谷镰刀菌

C.黄色镰刀菌

D.粉红镰刀菌

8.采用胶体金免疫层析快速检测法测定食品中呕吐毒素时，质控线（C线）显色，检测线（T线）比质控线（C线）显色深或检测线（T线）与质控线（C线）显色基本一致，判为（）。

A无效

B.阳性

C.阴性

D.无法判断

9.采用胶体金免疫层析快速检测法测定食品中呕吐毒素的检测限为（）。

A.1.0 mg/kg

B.2.0 mg/kg

C.5.0 mg/kg

D.10 mg/kg

10.玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN）又称为（）。

A.F-2毒素

B.禾谷镰刀菌

C.尖孢镰刀菌

D.雪腐镰刀菌

11.采用胶体金免疫层析法对食品中玉米赤霉烯酮进行快速检测时，若C线未显色，表明检测结果（）。

A.无法判断

B.阳性

C.阴性

D.无效

12.采用胶体金免疫层析法对食品中玉米赤霉烯酮进行快速检测时，控制C线显色，检测T线显色比C线浅或者没有颜色，判定为（）。

A无效

B.阳性

C.阴性

D.无法判断

13.采用化学方法鉴别小米（黄米）中是否掺有姜黄色素，如果出现（），则说明小米是用姜黄素染色的。

A.黄色

B.紫色

C.蓝色

D.橘红色

二、多选题

1.下列哪些食品中的硼砂可采用姜黄色素比色法快速检测？（）

A.糕点

B.豆制品

C.肉丸

D.蔬菜丸

2.在市场中购买的豆芽短粗、无根，则很有可能在豆芽的加工时加入了（）。

A.4-氯苯氧乙酸钠

B.6-苄氨基腺嘌呤

C赤霉素

D.尿素

答案及解析

一、单选题

1.B 2.C 3.B 4.D 5.D 6.C 7.A 8.C 9.A 10.A 11.D 12.B 13.D

二、多选题

1.ABCD 2.AB