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测定肉、蛋及其制品中脂肪的技巧训练

时间:2023-06-24 理论教育 版权反馈
【摘要】:前后两次称量结果相差应在0.002g以内。滤纸筒的高度不要超过回流弯管,否则超过弯管中的样品的脂肪不能提尽,会带来测定误差。对富含脂肪的样品,可在真空烘箱中进行干燥,这样可避免因脂肪氧化而造成的误差。5)抽提所用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物,挥发残渣含量低,否则水和醇会导致糖类及水溶性盐类等物质的溶出,使测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化,在烘干时还有引起爆炸的危险。

测定肉、蛋及其制品中脂肪的技巧训练

1.原理

索氏抽提法是经典方法,适用于脂类含量较高,含结合态脂肪较少,能烘干磨细,不易吸潮结块的样品的测定。将已经过预处理而干燥分散的样品,用无水乙醚石油醚等溶剂进行提取,使样品中的脂肪进入溶剂当中,然后从提取液中回收溶剂,最后所得到的残留物即为脂肪(或粗脂肪)。该方法测得的仅仅是游离态脂肪,而结合态脂肪未能测出来。

2.仪器与试剂

(1)仪器 索氏提取器、电热恒温水浴锅、电热恒温干燥箱(温控为100℃±5℃)、分析天平(感量为0.1mg)、备有变色硅胶的干燥器、圆孔筛(直径为1mm)、称量皿(铝质或玻璃质,内径为60~65mm,高度为25~30mm)、粉碎机、脱脂线、脱脂棉(将医用级棉花浸泡在乙醚或己烷中24h,期间搅拌数次,取出在空气中晾干)。

滤纸筒:取长度为28cm、宽度为17cm的滤纸,用直径为2cm的试管,沿滤纸长边卷成筒形,抽出试管至纸筒高的1/2处,压平抽空部分,折过来,使之紧靠试管外层,用脱脂线系住,将下部的折角向上折,压成圆形底部,抽出试管,即成直径为2cm、高度约为7.5cm的滤纸筒。滤纸应事先放入烧杯,于100~105℃烘箱内烘至恒重。

(2)试剂

1)无水乙醚:分析纯,不含过氧化物。

2)石油醚:分析纯,沸程为30~60℃。

3)海砂或河砂:直径为0.65~0.85mm,二氧化硅含量不低于99%(质量分数)。取用水洗去泥土的海砂或河砂,先用(1+1)盐酸溶液煮沸0.5h,用水洗至中性,再用氢氧化钠溶液(240g/L)煮沸0.5h,用水洗至中性,经100℃±5℃干燥备用。

3.操作步骤

1)将索氏抽提器各部位充分洗涤并用蒸馏水清洗、烘干,然后将接收瓶洗净后置于电热恒温干燥箱中干燥至恒重,称取其质量。前后两次称量结果相差应在0.002g以内。

2)试样的处理

①固体样品:肉用绞肉机绞两次,一般用组织捣碎器捣碎后,精确称取2~5g(可取测定水分后的试样),必要时拌以海砂,装入脂肪抽提器滤纸筒内。

②半固体或液体样品:精确称取5.0~10.0g样品置于蒸发皿中,加入海砂约20g,于沸水浴上蒸干后,再于95~105℃烘干、磨细,全部移入滤纸筒内。将蒸发皿及粘有样品的玻璃棒用蘸有乙醚(或石油醚)的脱脂棉擦净,将棉花一同放入滤纸筒内。

3)抽提:将装有试样的滤纸筒置于索氏抽提器抽提管内(滤纸筒的高度不能超过抽提筒虹吸管的高度),连接已干燥至恒重的接收瓶,由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处,于水浴(夏天65℃,冬天80℃左右)上加热,使乙醚或石油醚不断回流提取,抽提速度以每1min滴80滴左右,每1h回流6~8次为宜,一般回流萃取6~12h。提取结束时,用磨砂玻璃接取一滴提取液,若磨砂玻璃上无油斑,则表明提取完毕。

4)烘干、称量:提取完毕后,用长柄镊子取出滤纸筒,从索氏抽提器上取下接收瓶,回收乙醚或石油醚,待接收瓶内乙醚剩1~2mL时在水浴上蒸干,再于100℃±5℃恒温干燥箱中干燥2h,放于干燥器中冷却0.5h后称量。重复以上操作直至恒重,精确到0.1mg。两次称量结果的差不应超过0.002g。

4.结果计算

式中 X——试样中脂肪的含量(g/100g);

m2——接收瓶和脂肪的质量(g);

m1——接收瓶的质量(g);

m——样品的质量(若为测定水分后的试样,则按测定水分前的质量计)(g)。

5.注意事项(www.xing528.com)

1)样品必须干燥,样品中含水会影响溶剂提取效果,造成非脂成分的溶出。滤纸筒的高度不要超过回流弯管,否则超过弯管中的样品的脂肪不能提尽,会带来测定误差。

2)回收乙醚后,剩下的乙醚必须在水浴上彻底挥尽,否则放入烘箱中有爆炸的危险。乙醚在使用过程中,室内应保持良好的通风状态,仪器周围不能有明火,以防空气中有乙醚蒸气而引起着火或爆炸。

3)脂肪接收瓶反复加热时,会因脂类氧化而增重。质量增加时,应以增重前的质量为恒重。对富含脂肪的样品,可在真空烘箱中进行干燥,这样可避免因脂肪氧化而造成的误差。

4)抽提是否完全,可凭经验,也可用滤纸或毛玻璃检查,即让提脂管下口滴下的乙醚(或石油醚)滴在滤纸或毛玻璃上,若挥发后不留下痕迹,则表明已抽提完全。

5)抽提所用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物,挥发残渣含量低,否则水和醇会导致糖类及水溶性盐类等物质的溶出,使测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化,在烘干时还有引起爆炸的危险。

6)索氏抽提法为经典方法,测定准确,但费时、费试剂。

7)精密度要求:在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%,否则本次检验结果为无效。

8)计算结果保留至小数点后一位。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

式中 X——试样中脂肪的含量(g/100g);

m2——接收瓶和脂肪的质量(g);

m1——接收瓶的质量(g);

m——样品的质量(若为测定水分后的试样,则按测定水分前的质量计)(g)。

5.注意事项

1)样品必须干燥,样品中含水会影响溶剂提取效果,造成非脂成分的溶出。滤纸筒的高度不要超过回流弯管,否则超过弯管中的样品的脂肪不能提尽,会带来测定误差。

2)回收乙醚后,剩下的乙醚必须在水浴上彻底挥尽,否则放入烘箱中有爆炸的危险。乙醚在使用过程中,室内应保持良好的通风状态,仪器周围不能有明火,以防空气中有乙醚蒸气而引起着火或爆炸。

3)脂肪接收瓶反复加热时,会因脂类氧化而增重。质量增加时,应以增重前的质量为恒重。对富含脂肪的样品,可在真空烘箱中进行干燥,这样可避免因脂肪氧化而造成的误差。

4)抽提是否完全,可凭经验,也可用滤纸或毛玻璃检查,即让提脂管下口滴下的乙醚(或石油醚)滴在滤纸或毛玻璃上,若挥发后不留下痕迹,则表明已抽提完全。

5)抽提所用的乙醚或石油醚要求无水、无醇、无过氧化物,挥发残渣含量低,否则水和醇会导致糖类及水溶性盐类等物质的溶出,使测定结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化,在烘干时还有引起爆炸的危险。

6)索氏抽提法为经典方法,测定准确,但费时、费试剂。

7)精密度要求:在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%,否则本次检验结果为无效。

8)计算结果保留至小数点后一位。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

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